Altération de l’expression du gène MAT2A par les conditions de culture in vitro de l’embryon de mammifères : analyse des conséquences fonctionnelles

Projet de stage : Les conditions d’environnement amènent des modifications épigénétiques du génome embryonnaire, dont les répercussions pourraient remettre en cause l’innocuité des procédures d’AMP chez l’homme. En particulier, les modifications du métabolisme de la méthionine pourraient altérer l’épigénome et induire des phénotypes tardifs. Chez l’embryon de lapin choisi comme modèle (ses besoins métaboliques et ses cinétiques d’activation et de méthylation du génome sont proches de ceux de l’homme) certaines conditions de culture altèrent le niveau d’expression du gène MAT II A. Parce que cette enzyme est responsable de la synthèse de S adénosyl methionine, principal pourvoyeur de groupements méthyl pour les réactions de méthylation de l’ADN et des histones, nous en accentuerons la sous-expression par ARN interference pour étudier les conséquences fonctionnelles de l’altération de son expression sur le niveau général de méthylation du génome et sur le transcriptome de l’embryon.

Techniques mises en œuvre par le stagiaire : real time quantitative RT-PCR, immunoflurescence sur embryons de mammifères, transcriptomique, RNA interference