Conséquences de l’inflammation des cellules chorioniques sur le phénotype de la cellule myométriale humaine

Projet de stage : Notre objectif est d’aboutir à une meilleure connaissance des mécanismes physiologiques et physiopathologiques de l’accouchement. Notre hypothèse est qu’une modification du dialogue fœto-maternel, via le liquide amniotique et les membranes fœtales, est nécessaire à l’initiation de l’accouchement. Pendant la grossesse, le feuillet chorionique des membranes fœtales est la surface de contact la plus étendue entre les tissus fœtaux et les tissus maternels, i.e. la décidue et le myomètre adjacent, et le col utérin. Les cellules chorioniques sont des cellules endocrines uniques qui secrètent à l’interface foeto-maternelle des protéines contrôlant l’intégrité de la matrice extracellulaire des membranes et la contractilité du myomètre, déterminants essentiels du déclenchement de l’accouchement. L’objectif de cette étude d’identifier des messages d’origine chorionique susceptibles de moduler le phénotype de la cellule myométriale.

Techniques mises en œuvre par le stagiaire :

• Purification des cellules chorioniques humaines par digestion enzymatique des membranes fœtales

• Culture de cellules myométriales humaines par la méthode des explants

• Co-cultures cellules chorioniques/cellules myométriales à l’aide d’insert type transwell

• Immunoblot-blot, Immunofluorescence (FAK, plaque dense, état de phosphorylation de la chaîne légère de la mysosine, réorganisation du cytosquelette, apoptose…)

• Neutralisation par anticorps de facteurs signalétiques TNFα, IL1β, hCG…