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Contrôle épigénétique de la pluripotence

Stage proposé par Alice JOUNEAU

UMR biologie du Développement et Reproduction,bat 230, Domaine de Vilvert, INRA, 78350 Jouy-en-Josas


Projet de stage  : situation du sujet, objectif du stage, approches expérimentales (une dizaine de lignes maximum) 

Les cellules embryonnaires souches (ESC) et les cellules souches d’épiblaste (EpiSC) sont les représentantes in vitro (chez la souris) de deux états de pluripotence, naïve et amorcée. Nous avons montré qu’il y avait des différences épigénétiques notables (modifications d’histones, methylation de l’ADN, organisation de l’hétérochromatine) entre ces deux types de cellules pluripotentes. Nous nous intéressons maintenant à la dynamique de ces changements quand on passe d’un état à un autre de pluripotence (conversion des ESC vers les EpiSC), et quels mécanismes moléculaires les contrôlent. Plus largement ce projet s’inscrit dans celui de l’équipe qui vise à mieux comprendre la notion de barrière épigénétique qui existe entre les ESC et les EpiSC, et les différences phénotypiques et fonctionnelles entre les deux états de pluripotence.

Techniques mises en œuvre par le stagiaire  :

Culture de cellules souches pluripotentes, immuno-marquage de cellules et d’embryons, RT-PCR quantitative.

Publications du responsable de stage au cours des 5 dernières années : Papanayotou C, Benhaddou A, Camus A, Perea-Gomez A, Jouneau A, Mezger V, Langa F, Ott S, Sabéran-Djoneidi D, Collignon J. A novel nodal enhancer dependent on pluripotency factors and smad2/3 signaling conditions a regulatory switch during epiblast maturation. PLoS Biol. 2014 Jun 24 ;12(6) :e1001890. Veillard AC, Marks H, Bernardo AS, Jouneau L, Laloë D, Boulanger L, Kaan A, Brochard V, Tosolini M, Pedersen R, Stunnenberg H, Jouneau A. Stable methylation at promoters distinguishes epiblast stem cells from embryonic stem cells and the in vivo epiblasts. Stem Cells Dev. 2014 Sep 1 ;23(17):2014-29. Fröhlich T, Kösters M, Graf A, Wolf E, Kobolak J, Brochard V, Dinnyés A, Jouneau A, Arnold GJ. iTRAQ proteome analysis reflects a progressed differentiation state of epiblast derived versus inner cell mass derived murine embryonic stem cells. J Proteomics. 2013 Sep 2 ;90:38-51. Gall L, Brochard V, Ruffini S, Laffont L, Fleurot R, Lavin TA, Jouneau A, Beaujean N. Intermediate filaments promote nuclear mechanical constraints during somatic cell nuclear transfer in the mouse. Cell Reprogram. 2012 Dec ;14(6):497-504. Maruotti J, Muñoz M, Degrelle SA, Gómez E, Louet C, Díez C, de Longchamp PH, Brochard V, Hue I, Caamaño JN, Jouneau A. Efficient derivation of bovine embryonic stem cells needs more than active core pluripotency factors. Mol Reprod Dev. 2012 Jul ;79(7):461-77.

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