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> Stages de M2 > Liste des stages proposés pour l’année 2015-2016 > Dynamique ovocytaire et implantation chez les mammifères.

Dynamique ovocytaire et implantation chez les mammifères.

proposé par Guillaume HALET, Equipe Dynamique Ovocytaire et Implantation chez les Mammifères, Institut de Génétique et Développement, CNRS UMR6290, Rennes

Projet de Stage M2 : Pour devenir un gamète haploïde apte à être fécondé et à générer un embryon viable, l’ovocyte doit accomplir deux divisions méiotiques et expulser deux globules polaires. Ces divisions, fortement asymétriques, résultent du positionnement du fuseau de division à proximité du cortex ovocytaire, qui devient polarisé. Cette polarisation se traduit par l’accumulation de protéines du cytosquelette (actine, myosine) et de protéines dites « de polarité » dans la région du cortex qui surplombe le fuseau méiotique en métaphase I ou métaphase II. Une autre caractéristique de la polarisation est la disparition des microvillosités membranaires dans la région qui surplombe le fuseau. Un défaut de polarisation conduit à l’absence de globule polaire, et une infertilité. La cascade de signalisation conduisant à la mise en place de cette polarisation ovocytaire n’est que partiellement caractérisée. On sait que chez la souris, la polarisation du cortex ovocytaire est induite par la proximité des chromosomes métaphasiques, et implique la GTPase Ran. Nous avons montré que Ran déclenche l’activation de la GTPase Cdc42 au cortex, nécessaire à la polarisation. Au cours de ce stage, le projet consistera à examiner le mécanisme par lequel Ran induit l’activation polarisée de Cdc42 et la disparition des microvillosités membranaires. Le stagiaire recherchera les partenaires de la protéine Ran et tentera d’identifier de nouveaux intermédiaires dans la cascade de signalisation.

Techniques mises en œuvre par le stagiaire : Culture d’ovocytes de souris ; micro-injection des ovocytes ; immuno-fluorescence ; microscopie confocale ; Western blot ; clonage plasmidique ; mutagenèse dirigée.

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