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Etude du transporteur anionique TAT1 dans les asthénozoospermies humaines

proposé par Aminata Touré, Institut Cochin, CNRS UMR8104, INSERM U567, Université René Descartes, 24 rue du Faubourg Saint-Jacques, 75014 Paris

Projet de stage : La protéine TAT1/Slc26A8 (Testis Anion Transporter 1) est un transporteur d’anions spécifiquement exprimé dans les cellules germinales en cours de spermiogenèse. Nous avons généré par recombinaison homologue, des souris délétées pour le gène Tat1 et caractérisé leur phénotype. De manière intéressante, les souris homozygotes mâles Tat1-/- sont totalement stériles ; les spermatozoïdes Tat1-/- présentent des défauts de structure du flagelle, une absence totale de mobilité et des défauts de capacitation. TAT1 appartient à la famille des transporteurs anioniques SLC26 dont plusieurs membres chez l’homme, présentent des mutations "perte de fonction" conduisant à des maladies. Du fait de l’expression exclusive de Tat1 dans les cellules germinales mâles, chez l’homme comme chez la souris, nous proposons d’étudier l’implication de Tat1 dans les infertilités humaines. Nous avons sélectionné une population de patients infertiles présentant une asthénozoospermie et/ou des défauts flagellaires. Nous analyserons la séquence du gène TAT1 de ces patients, ainsi que l’expression de la protéine TAT1 par immunofluorscence sur des préparations de sperme. Ce projet devrait permettre de définir la cause moléculaire de certaines asthénozoospermies humaines.

Techniques mises en œuvre par le stagiaire : Biologie moléculaire : Extraction d’ADN génomique, amplification d’ADN, PCR, RT-PCR, clonage, séquençage. Analyse de séquence : logiciel de comparaison & multialignement Immunofluorescence sur étalements de spermatozoïdes humains

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