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Exploration du système des Bone Morphogenic protein (BMP) dans les cellules de granulosa humaine

proposé par Annie Benhaim et Hervé Mittre, Estrogènes et Reproduction, USC 2006 INRA –EA 2608, Caen

Projet de stage : Les mécanismes intervenant dans le processus de folliculogénèse sont bien compris, néanmoins ceux déterminant le nombre de follicule(s) ovulant(s) étaient inconnus jusqu à l’identification récente chez la brebis des gènes de « la fécondité » codant pour des protéines du système Bone Morphogenetic Protéins (BMP). L’implication des BMP dans la physiologie du follicule ovarien humain est à ce jour peu explorée. Une altération de l’expression des BMP ovocytaires ou granulaires, ou une anomalie de la réceptivité folliculaire aux BMP pourraient jouer un rôle dans les perturbations de la folliculogenèse observées dans certaines pathologies. L’étude cherchera dans un premier temps à mesurer l’expression de certaines BMP et de leurs récepteurs dans des cellules de granulosa humaine provenant de femmes ne présentant pas de pathologie de la fertilité. Nous rechercherons également l’implication des BMP 6, 7 humaine sur la stéroïdogénèse des cellules de granulosa en culture primaire Ce travail constituera un préalable à une étude plus large visant à déterminer l’implication du système ligand/récepteur des BMP dans les syndromes ovariens caractérisés par une anomalie de la folliculogénèse, tels le syndrome des ovaires polykystiques et le syndrome d’hyperstimulation ovarienne.

Techniques mises en œuvre par le stagiaire :
- Extraction des ARN messagers des cellules de granulosa humaine
- PCR temps reel : BMP6, BMP 7, BMP 15, GDF9, récepteurs ALK6 et BMP-RII
- Western Blot des protéines BMP 6, BMP7 et de leurs récepteurs dans les extraits de cellules de granulosa
- Culture primaire de cellules de granulosa humaine
- Dosage radioimmunologique de stéroïdes

Documents joints

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