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La séparation des chromosomes en méiose I dans l’ovocyte de souris

proposé par Katja Wassmann, CNRS - Paris (75)

Projet de stage : Au cours de chaque division, la séparation des chromosomes homologues ou des chromatides sœurs dépend de l’activation de la Séparase qui permet de cliver les Cohésines à la transition métaphase-anaphase. Afin de clarifier les causes entraînant des problèmes de ségrégation des chromosomes lors de la méiose femelle, nous utilisons les modèles ascidiens et murins dans le but d’élucider les mécanismes de ségrégation des chromosomes dans l’ovocyte. Nous étudions comment les chromosomes sont maintenus ensemble par le complexe protéique appelé Cohésine, qui est enlevé par un procédé en deux temps lors des deux divisions méiotiques. Un groupe de Cohésines ne peut être enlevé qu’en méiose II car il est protégé en méiose I. Les mécanismes de protection des Cohésines sont de mieux en mieux décrits ; en revanche, les mécanismes de « déprotection » en méiose II sont peu connus. Nous proposons ainsi de déterminer comment se déroule la « déprotection » en méiose II.

Techniques mises en œuvre par le stagiaire : Récolte des ovocytes de souris et d’ascidi, Western blot, co-immunoprécipitations, microscopie en temps réel, microscopie confocale, traitement d’images, micro- injection des ovocytes de souris pour exprimer des protéines avec des "tags" fluorescent, préparation des ARN, RT-PCR, clonage.

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