Le Pré-Implantation Factor (PIF) : un bio-marqueur de viabilité embryonnaire intérêt de son utilisation en fécondation in vitro et durant la grossesse

Projet de stage : Le PIF (Preimplantation Factor) est un peptide de 15 acides aminés qui est produit dès le stade 2 cellules par l’embryon. Si le rôle du PIF n’est pas encore clairement identifié, il a été montré un impact sur l’invasion de cellules trophoblastiques immortalisées à des doses physiologiques. De plus, il a été identifié dans le sang circulant de nombreuses espèces mammifères à des taux élevés en début de grossesse, puis réduit en fin de celle-ci. L’objectif de ce travail est donc multiple : 1- Evaluer l’intérêt du dosage du PIF dans le surnageant embryonnaire, comme facteur de viabilité embryonnaire 2- Etudier le taux sérique du PIF dans le sang maternel, pour évaluer son évolution au décours de la grossesse, mais aussi en cas de complication majeure 3- Etudier l’expression placentaire du PIF au cours de la grossesse et en cas de pathologie de celle-ci 4- Etudier l’impact de PIF sur les cultures primitives de placenta

Techniques mises en œuvre par le stagiaire : 1- Développement d’une technique de dosage dans le sang circulant et dans le surnageant de culture embryonnaire. a. Développement d’une technique ELISA sur billes b. Développement d’une plateforme 2- Réalisation de technique d’immuno-marquage sur placenta 3- Etude de la prolifération placentaire sur des cultures primaires a. Analyse de la prolifération cellulaire b. Analyse du protéome