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Le récepteur de la GnRH : Identification des mécanismes régulant sa signalisation

proposé par Joelle COHEN-TANNOUDJI et Violaine SIMON, Biologie Fonctionnelle et Adaptative – Equipe Physiologie de l’Axe Gonadotrope, Université Paris 7, Bâtiment Buffon – 75013 Paris

Projet de stage : Chez les mammifères, la fonction de reproduction est sous le contrôle de la neurohormone hypothalamique GnRH qui active un récepteur à 7 domaines transmembranaires dans les cellules gonadotropes de l’hypophyse, le récepteur de la GnRH (R-GnRH). Bien que l’on connaisse la plupart des voies de signalisation activées par le R-GnRH, les mécanismes qui régulent la spécificité et l’efficacité de la signalisation de ce récepteur demeurent inconnus. Or ces mécanismes sont essentiels pour la mise en place des étapes clefs de la reproduction. Très récemment, nous avons montré pour la première fois que le R-GnRH interagit avec un grand nombre de protéines cellulaires, distinctes de la protéine G hétérotrimérique. Ces protéines influencent très probablement la signalisation du récepteur et le but du stage que nous proposons sera de déterminer leur impact respectif sur la fonctionnalité du récepteur. Pour cela, nous évaluerons l’impact sur la signalisation du récepteur (i) de mutations du R-GnRH le rendant inapte à interagir avec ces protéines et/ou (ii) d’une déplétion de l’expression de ces protéines dans la cellule par transfection d’ARN antisens. Ce stage est susceptible de déboucher sur un stage en M2.

Techniques mises en œuvre par le stagiaire : Mutagenèse dirigée, culture cellulaire, transfection d’ADN et d’ARN antisens, étude de la signalisation (mesure en temps réel des flux calciques et des nucléotides cycliques avec la plateforme Flex Station III)

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