Lien fonctionnel entre la méthylation de l’histone H3 et la formation des cassures double-brin méiotiques

Projet de stage : Les cassures double-brin déclenchant la recombinaison homologue sont indispensables au succès de la méiose et à la production de gamètes viables. Ces cassures sont formées par la protéine Spo11, mais les facteurs nécessaires à son action sur les chromosomes sont peu connus. Nous avons récemment identifié une modification d’histone comme étant impliquée dans la formation de la cassure double brin. Le but du stage est de mieux caractériser la fonction de cette modification d’histone en méiose. Notre modèle d’étude est la levure Saccharomyces cerevisiae. Les approches expérimentales seront d’identifier les interactions en méiose de l’histone H3 modifiée avec les protéines connues pour etre impliquées dans la formation des cassures double-brin. Le stage consistera également à cibler la méthylation de l’histone H3 dans des régions peu methylées du génome, pour voir si cela est suffisant pour introduire de nouvelles cassures.

Techniques mises en œuvre par le stagiaire :

Biologie moléculaire : préparation d’ADN génomiques – Southern Blot – PCR – préparation d’extraits protéiques – Western Blot – clonage de plasmides dans des bactéries

Expériences simples de génétique