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Placentation humaine et physiopathologie de la pré-éclampsie : implication de la lysyl oxidase.

proposé par Thierry Fournier, Inserm U767, Faculté de Pharmacie, 4 avenue de l’Observatoire, 75006 Paris

Projet de stage : L’implantation humaine est caractérisée par une invasion profonde de l’utérus par le trophoblaste, un processus physiologique indispensable au maintien de la grossesse et à la croissance fœtale. Un défaut d’invasion trophoblastique est une cause de la pré-éclampsie, pathologie fréquente mettant en jeu le pronostic maternel et fœtal. L’équipe d’accueil a développé des modèles in vitro pour étudier les mécanismes qui contrôlent cette invasion de type pseudotumorale. Ils ont ainsi montré que la lysyl oxydase (LOX) était un gène cible du PPAR, un récepteur nucléaire jouant un rôle essentiel dans le contrôle de l’invasion trophoblastique. La LOX est un suppresseur de tumeurs et sa surexpression pourrait restreindre l’invasion trophoblastique physiologique et être impliquée dans la physiopathologie de la pré-éclampsie. Notre objectif est d’étudier l’expression trophoblastique de la LOX au cours de grossesses « normales » et « pré-éclamptiques » par des techniques d’immunohisto et cytochimie, de Western blot et de Q-PCR. Le dosage de la forme soluble de LOX dans le serum des femmes enceintes pourrait être intégrés dans le dépistage de la pré-éclampsie

Techniques mises en œuvre par le stagiaire : Analyse de l’expression et de la localisation subcellulaire des protéines LOX et LOXL par des techniques d’immunohistochimie et d’immunocytochimie après isolement et culture des trophoblastes (microscopie confocale). L’analyse comparative (grossesses normales vs pathologiques) sera effectuée de façon semi-quantitative par immunoblot à partir de tissus placentaires et de cultures primaires de trophoblastes (formes intracellulaires) et les surnageants de culture (forme sécrétée).

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