print

> Stages de M2 > Liste des stages proposés pour l’année 2009-2010 > Liste des stages proposés pour l’année 2010-2011 > Régulation de l’expression de séquences rétrovirales endogènes au cours (...)

Régulation de l’expression de séquences rétrovirales endogènes au cours du développement chez les Mammifères. Mise en place d’une étude fonctionnelle.

proposé par Véronique DURANTHON, UMR Biologie du Développement et Reproduction, INRA, Domaine de Vilvert, 78350 Jouy en Josas

Projet de stage : Dans le cadre des analyses de l’expression des gènes juste après la fécondation, nos résultats mettent en évidence une expression forte et transitoire de séquences de type retro-transposons au moment de l’activation transcriptionnelle du génome embryonnaire avant toute différenciation. Cette expression est fidèlement reprogrammée lorsqu’ un noyau somatique (qui ne les exprime pas) est transféré dans le cytoplasme ovocytaire par clonage (Bui et al. 2009). Alors que les retro-transposons représentent jusqu’à un tiers du génome des mammifères et qu’une expression finement régulée de certaines de ces séquences a été mise en évidence dans l’ovocyte et l’embryon, le rôle des transcrits codant pour ces séquences demeure inconnu au cours du développement précoce. Nos résultats récents nous amènent à faire l’hypothèse d’un lien fonctionnel entre l’expression de ces séquences et la pluripotence cellulaire. Afin de tester cette hypothèse, nous poursuivons nos analyses par la mise en œuvre d’une approche fonctionnelle par ARN interférence dans l’embryon préimplantatoire et en cellules pluripotentes. L’étudiant participera à la validation de cette approche et analysera les conséquences fonctionnelles d’une réduction de l’expression de ces séquences sur le développement précoce.

Techniques mises en œuvre par le stagiaire : récolte et culture in vitro d’embryons de lapin, RT-PCR quantitative en temps réel, hybridation in situ, analyse phénotypique d’embryons préimplantatoires, culture et transfection de cellules.

- Site propulsé par Spip 1.9 -
-- Master de reproduction et développement - http://www.reprodev.fr --