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Relation entre vacuoles céphaliques du spermatozoïde et altération de son génome : étude d’un groupe témoin d’hommes féconds et d’un groupe de patients traités par chimiothérapie

proposé par Louis Bujan, CHU Toulouse

Projet de stage : Situation du sujet : Une analyse fine de la morphologie spermatique à très fort grossissement (x6.000 à 10.000) a été récemment développée. Cette technique optique permet de déceler des vacuoles au niveau de la tête du spermatozoïde. Des publications récentes mettent en évidence des altérations nucléaires en relation avec les vacuoles. La mise en évidence de ces vacuoles dans des situations connues d’altération du génome du spermatozoïde pourrait apporter des éléments de réponse supplémentaires sur l’origine de ces vacuoles. La chimiothérapie est une de ces situations, car les altérations de la spermatogénèse mais également du génome du spermatozoïde sont connues durant et dans les suites immédiates de ce traitement. Objectif du stage : Cette étude pilote a pour objectif de caractériser les vacuoles céphaliques du spermatozoïde et de rechercher les liens entre celles-ci et les altérations du génome du spermatozoïde dans un groupe témoin mais également dans un groupe de patient traité par chimiothérapie. Méthodes : Une évaluation des vacuoles du spermatozoïde (nombre, surface, position) est effectuée après acquisition d’images à fort grossissement (x6000). L’étude de la chromatine du spermatozoïde sera effectuée grâce au Sperm Chromatine Structure assay, la fragmentation de l’ADN sera étudiée grâce au test TUNEL et le taux d’aneuploïdie sera étudié par hybridation de sondes chromosomiques.

Techniques mises en œuvre par le stagiaire : MSOME (Motile Sperm Organellar Morphology Examination), SCSA (Sperm Chromatin Structure Assay), TUNEL, Cytofluorométrie, FISH, Congélation de sperme et examens classiques du sperme.

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