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Rôle fonctionnel de Topaz1, gène indispensable pour la spermatogenèse murine

Stage proposé par Béatrice Mandon-Pépin « CR1 - INRA »

UMR Biologie du Développement et Reproduction INRA de Jouy en Josas (78)


Projet de stage : situation du sujet, objectif du stage, approches expérimentales (une dizaine de lignes maximum) 

Au laboratoire nous avons isolé un nouveau gène : Topaz1 (Testis and Ovary specific PAZ domain gene 1) (Baillet 2008, 2011) impliqué dans la prophase I de méiose chez les mammifères. Ce gène, hautement conservé chez les vertébrés, est spécifique des cellules germinales. Afin d’étudier le rôle de Topaz1, nous avons généré un modèle murin dépourvu de ce gène. Alors que les femelles sont fertiles, les mâles sont stériles dûs à un arrêt de la spermatogenèse lors de la première division méiotique. Cet arrêt n’est pas dû à un défaut de formation du complexe synaptonémal ni à la non-répression des rétrotransposons. Les testicules de ces souris mutantes, comparés à des animaux normaux, présentent un transcriptome perturbé avec notamment la dérégulation de l’expression de longs ARNs non codants (lncRNAs) et de plusieurs gènes inconnus (Luangpraseuth-Prosper et al., 2015). Nous travaillons actuellement sur deux objectifs : mettre au point un anticorps spécifique anti-TOPAZ1 et étudier les gènes dérégulés lors de l’absence du gène Topaz1. L’étudiant participera à ces 2 projets en parallèle.

Techniques mises en œuvre par le stagiaire  : Biologie moléculaire : Extraction d’ADN (génotypage des souris), PCR et RT-PCR, PCR en temps réel. Histologie, immunohistochimie. Suivi de la lignée murine (croisement).

Publications du responsable de stage au cours des 5 dernières années :

Luangpraseuth-Prosper A, Lesueur E, Jouneau L, Pailhoux E, Cotinot C, Mandon-Pépin B. TOPAZ1, a germ cell specific factor, is essential for male meiotic progression. Dev Biol. 2015 Sep 7. pii : S0012-1606(15)30163-9. doi : 10.1016/j.ydbio.2015.09.002.

Léveillé P, Tarrade A, Dupont C, Larcher T, Dahirel M, Poumerol E, Cordier AG, Picone O, Mandon-Pepin B, Jolivet G, Lévy R, Chavatte-Palmer P. Maternal high-fat diet induces follicular atresia but does not affect fertility in adult rabbit offspring. J Dev Orig Health Dis. 2014 Apr ;5(2):88-97. doi : 10.1017/S2040174414000014.

Bonnet A, Cabau C, Bouchez O, Sarry J, Marsaud N, Foissac S, Woloszyn F, Mulsant P, Mandon-Pepin B. An overview of gene expression dynamics during early ovarian folliculogenesis : specificity of follicular compartments and bi-directional dialog. BMC Genomics. 2013 Dec 19 ;14:904. doi : 10.1186/1471-2164-14-904.

Bellingham M, Amezaga MR, Mandon-Pepin B, Speers CJ, Kyle CE, Evans NP, Sharpe RM, Cotinot C, Rhind SM, Fowler PA. Exposure to chemical cocktails before or after conception--- the effect of timing on ovarian development. Mol Cell Endocrinol. 2013 Aug 25 ;376(1-2):156-72. doi : 10.1016/j.mce.2013.06.016. Epub 2013 Jun 20.

Cordier AG, Léveillé P, Dupont C, Tarrade A, Picone O, Larcher T, Dahirel M, Poumerol E, Mandon-Pepin B, Lévy R, Chavatte-Palmer P. Dietary lipid and cholesterol induce ovarian dysfunction and abnormal LH response to stimulation in rabbits. PLoS One. 2013 May 14 ;8(5) :e63101. doi : 10.1371/journal.pone.0063101. Print 2013.

Hombach-Klonisch S, Danescu A, Begum F, Amezaga MR, Rhind SM, Sharpe RM, Evans NP, Bellingham M, Cotinot C, Mandon-Pepin B, Fowler PA, Klonisch T. Peri-conceptional changes in maternal exposure to sewage sludge chemicals disturbs fetal thyroid gland development in sheep. Mol Cell Endocrinol. 2013 Mar 10 ;367(1-2):98-108. doi : 10.1016/j.mce.2012.12.022. Epub 2013 Jan 4.

Dupont C, Cordier AG, Junien C, Mandon-Pépin B, Levy R, Chavatte-Palmer P. Maternal environment and the reproductive function of the offspring. Theriogenology. 2012 Oct 15 ;78(7):1405-14. doi : 10.1016/j.theriogenology.2012.06.016. Epub 2012 Aug 24. Review.

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